Реферат: Разработка методик качественного и количественного анализа действующих веществ экстракта плодов аронии черноплодной

Med-books.by - Библиотека медицинской литературы. Книги, справочники, лекции, аудиокниги по медицине. Банк рефератов. Медицинские рефераты. Всё для студента-медика.
Скачать бесплатно без регистрации или купить электронные и печатные бумажные медицинские книги (DJVU, PDF, DOC, CHM, FB2, TXT), истории болезней, рефераты, монографии, лекции, презентации по медицине.


=> Книги / Медицинская литература: Акупунктура | Акушерство | Аллергология и иммунология | Анатомия человека | Английский язык | Анестезиология и реаниматология | Антропология | БиоХимия | Валеология | Ветеринария | Внутренние болезни (Терапия) | Военная медицина | Гастроэнтерология | Гематология | Генетика | География | Геронтология и гериатрия | Гигиена | Гинекология | Гистология, Цитология, Эмбриология | Гомеопатия | ДерматоВенерология | Диагностика / Методы исследования | Диетология | Инфекционные болезни | История медицины | Йога | Кардиология | Книги о здоровье | Косметология | Латинский язык | Логопедия | Массаж | Математика | Медицина Экстремальных Ситуаций | Медицинская биология | Медицинская информатика | Медицинская статистика | Медицинская этика | Медицинские приборы и аппараты | Медицинское материаловедение | Микробиология | Наркология | Неврология и нейрохирургия | Нефрология | Нормальная физиология | Общий уход | О достижении успеха в жизни | ОЗЗ | Онкология | Оториноларингология | Офтальмология | Паллиативная медицина | Паразитология | Патологическая анатомия | Патологическая физиология | Педиатрия | Поликлиническая терапия | Пропедевтика внутренних болезней | Профессиональные болезни | Психиатрия-Психология | Пульмонология | Ревматология | Сестринское дело | Социальная медицина | Спортивная медицина | Стоматология | Судебная медицина | Тибетская медицина | Топографическая анатомия и оперативная хирургия | Травматология и ортопедия | Ультразвуковая диагностика (УЗИ) | Урология | Фармакология | Физика | Физиотерапия | Физическая культура | Философия | Фтизиатрия | Химия | Хирургия | Экологическая медицина | Экономическая теория | Эндокринология | Эпидемиология | Ядерная медицина

=> Истории болезней: Акушерство | Аллергология и иммунология | Ангиология | Внутренние болезни (Терапия) | Гастроэнтерология | Гематология | Гинекология | ДерматоВенерология | Инфекционные болезни | Кардиология | Наркология | Неврология | Нефрология | Онкология | Оториноларингология | Офтальмология | Педиатрия | Профессиональные болезни | Психиатрия | Пульмонология | Ревматология | Стоматология | Судебная медицина | Травматология и ортопедия | Урология | Фтизиатрия | Хирургия | Эндокринология

=> Рефераты / Лекции: Акушерство | Аллергология и иммунология | Анатомия человека | Анестезиология и реаниматология | Биология | Биохимия | Валеология | Ветеринария | Внутренние болезни (Терапия) | Гастроэнтерология | Генетика | Гигиена | Гинекология | Гистология, Цитология, Эмбриология | Диагностика | ДерматоВенерология | Инфекционные болезни | История медицины | Лечебная физкультура / Физическая культура | Кардиология | Массаж | Медицинская реабилитация | Микробиология | Наркология | Неврология | Нефрология | Нормальная физиология | Общий уход / Сестринское дело | Озз | Онкология | Оториноларингология | Офтальмология | Патологическая анатомия | Педиатрия | ПатоФизиология | Профессиональные болезни | Психиатрия-Психология | Пульмонология | Ревматология | Скорая и неотложная медицинская помощь | Стоматология | Судебная медицина | Токсикология | Травматология и ортопедия | Урология | Фармакогнозия | Фармакология | Фармация | Физиотерапия | Фтизиатрия | Химия | Хирургия | Эндокринология | Эпидемиология | Этика и деонтология

=> Другие разделы: Авторы | Видео | Клинические протоколы / Нормативная документация РБ | Красота и здоровье | Медицинские журналы | Медицинские статьи | Наука и техника | Новости сайта | Практические навыки | Презентации | Шпаргалки


Med-books.by - Библиотека медицинской литературы » Рефераты: Химия » Реферат: Разработка методик качественного и количественного анализа действующих веществ экстракта плодов аронии черноплодной

Реферат: Разработка методик качественного и количественного анализа действующих веществ экстракта плодов аронии черноплодной

0

Скачать бесплатно реферат:
«Разработка методик качественного и количественного анализа действующих веществ экстракта плодов аронии черноплодной»


ОГЛАВЛЕНИЕ

Введение
Глава 1. Обзор литературы
.1 Плоды рябины черноплодной. Характеристика ЛРС, применение в медицине
1.2 Физико-химические свойства антоцианов, применение
Глава 2. Материалы и методы исследования
Глава 3. Обсуждение результатов
.1 Получение водно-спиртового экстракта
.2 Качественный анализ
.3 Количественный анализ
.4 Фракционирование органическими растворителями
Выводы
Список литературы


ВВЕДЕНИЕ

Плоды аронии черноплодной (Aronia melanocarpa) применяются в Российской Федерации в качестве поливитаминного средства. Основной нормативный документ на данный вид сырья - фармакопейная статья ФС 42-66-87. Необходимость пересмотра устаревших методик определения качественного и количественного состава очевидна. Это позволит не только повысить качество продукции, но и заметно упростить анализ данного сырья. К тому же данная статья предусматривает анализ только свежего сырья. Методики определения качества сухих плодов вообще не приводится.
Для более детального изучения биохимического состава плодов аронии предполагается использовать метод фракционирования, основанный на различной растворимости каждой из групп биологически активных соединений в определённых органических растворителях.
В соответствии с современными методологическими подходами лекарственное растительное сырье целесообразно анализировать по ведущей группе биологически активных веществ (БАВ), что продиктовано наибольшей ее уязвимостью к технологическим стадиям заготовки и хранения сырья, а также производства препаратов на его основе. Ведущей группой БАВ плодов аронии черноплодной являются антоцианы, однако в ней присутствует и целый комплекс других не менее полезных и активных соединений, которые ещё не совсем изучены.
Таким образом, целью данной работы является: изучение качественного и количественного состава БАВ в экстракте плодов аронии черноплодной.
Задачи:
1. Провести анализ литературных данных.
2. Получение водно-спиртового экстракта из плодов аронии.
3. Провести качественный и количественный анализ полученного экстракта.
4. Разделение на фракции экстракта плодов аронии, с использованием органических растворителей.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Плоды рябины черноплодной. Характеристика ЛРС, применение в медицине

Арония (рябина) черноплодная - Aronia melanocarpa, относящаяся к семейству розоцветные - Rosaceae, представляет собой Листопадный кустарник высотой до 3 м. Продуктивный возраст ветвей не более 10 лет. Восстановление куста происходит за счет ежегодно образующихся порослевых побегов и корневых отпрысков. Однолетние побеги красно-бурые, побеги старшего возраста темно-серые. Корневая система мощная, поверхностная, мочковатая, состоит из вертикально и горизонтально расположенных корней.
Листья очередные, широкоовальные или обратно-яйцевидные, длиной 4-8 см и шириной 3-5 см, простые, цельные, летом ярко-зеленые, осенью красные; верхняя сторона листьев кожистая, глянцевая, гладкая, темно-зеленая, нижняя - слабоопушенная с беловато-матовым оттенком.
Цветки собраны по 12-35 шт. в плотных щитовидных соцветиях; лепестки белые или чуть розоватые. Цветет арония в мае-июне, примерно через 2 недели после распускания листьев, цветение продолжается 12-15 дней. Позднее цветение аронии исключает возможность повреждения цветков весенними заморозками, что обеспечивает ежегодное плодоношение этого растения. Арония - самоопыляемое растение.
Плоды шаровидные или чуть вытянутые, яблокообразные, до 1,5 см в диаметре, голые, черные, блестящие, иногда с сизым налетом, реже темно-красные, сочные, кисловато-сладкие с вяжущим привкусом. Плоды созревают в августе-сентябре, не осыпаются до заморозков.
Родиной этого растения является Северная Америка, в России широко культивируется, благодаря своей неприхотливости и зимостойкости интродуцирована почти во всех экологогеографических районах нашей страны, даже в тех, где затруднено возделывание других плодово-ягодных культур [1].
В свежих плодах содержатся гликозиды цианидина, флаваноновый гликозид гесперидин, флавоноловый рутин, свободный кверцетин и некоторые другие флавоноиды. Присутствуют катехины и дубильные вещества, аскорбиновая кислота (около 110 мг/100 г), витамины B1, B6, Е, РР, органические кислоты (0,8%), микроэлементы (соли молибдена, марганца, меди, бора), каротиноиды и до 10% сахаров (глюкоза, фруктоза, сахароза). Основной химической группой считают антоцины.

Антоцианы аронии черноплодной представлены цианидином (рис.1) и его гликозидированными формами - цнанидин-3-гликозидом, цианидин-3-5-диглюкозидом, цианидин-3-галактозидом. Из лейкоантоцианов в плодах находится главным образом лейкоцианидин [5].
Свежие плоды назначают для профилактики Р-витаминной недостаточности, лечения гипертонической болезни I и II стадии и других заболеваний, сопровождающихся повышением артериального давления. Принимают по 100 г 3 раза в день; курс лечения 10-30 дней. Сок аронии черноплодной применяют в начальной стадии гипертонической болезни, при кровотечениях различного происхождения, при атеросклерозе, анацидных гастритах. Плоды аронии принимают при гепатитах, аллергиях, отравлениях. Плоды противопоказаны больным с повышенной свертываемостью крови, а также при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки и гиперацидном состоянии желудка.
Лечебные свойства плодов аронии сохраняются и при их переработке. Выявлено, что в 3 столовых ложках (50 г сухих плодов) черноплодной рябины заключено столько витамина Р, которое обеспечивает его суточную дозу при этом авитаминозе. Вяжущий вкус черноплодки напоминает о том, что она содержит много дубильных веществ, органических кислот и пектинов, а значит, прекрасно влияет на пищеварение [4].
Так как черноплодная рябина содержит большое количество органических кислот, при гиперацидном гастрите и язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки ее употребляют умеренно и только вне обострений. Также употребление плодов и сока лекарственной черноплодной рябины противопоказано при язве 12-перстной кишки, язвенной болезни желудка, при пониженном давлении, тромбофлебитах, частых запорах, пациентам с повышенной свертываемостью крови [9].

1.2 Физико-химические свойства антоцианов, применение

Антоцианами называют группы растительных пигментов, обусловливающих окраску цветов, а также плодов и ягод. Они широко распространены в растительном мире. Однако среди плодовых и ягодных растений мало культур, которые характеризовались бы таким высоким содержанием антоциановых пигментов, как арония черноплодная.
Строение антоцианов установлено в 1913 году немецким биохимиком Р. Вильштеттером , первый химический синтез осуществлен в 1928 английским химиком Р. Робинсоном.
Общая формула антоцианов представлена на рисунке 2:

Антоцианы являются гликозидами, содержащими в качестве агликона-антоцианидина гидрокси- и метоксизамещённые соли флавилия (2-фенилхроменилия), у некоторых антоцианов гидроксильные группы ацетилированы. Углеводная часть связана с агликоном обычно в положении 3, у некоторых антоцианов - в положениях 3 и 5, при этом в роли углеводного остатка могут выступать как моносахариды глюкоза , рамноза , галактоза , так и ди- и трисахариды.
Антоцианы представляют собой окрашенные кристаллы , легко растворимые в воде и других полярных растворителях, трудно растворимы - в спирте , бензоле . При нагревании с разбавленными кислотами или при действии некоторых ферментов , отщепляется остаток углевода с образованием пирилиевых солей , которыми обусловлено разнообразие окрасок плодов и цветков растений. Соли щелочных металлов также имеют окраску. В нейтральной среде антоцианы находятся в виде хиноидной структуры. Свободные основания антоцианов и антоцианидов окрашены в фиолетовый цвет. Таким образом, красная, синяя и фиолетовая окраска некоторых цветов и ягод может вызываться наличием одного и того же типа антоцианидина в зависимости от реакции клеточного сока. В синих частях растений он находится в виде калиевой или иной щелочной соли, в красных - в виде оксониевых солей органической кислоты (например, щавелевой кислоты), а в фиолетовой - в виде основания красящего вещества или внутренней соли.
В силу высокой электрофильности хроменилиевого цикла структура и, соответственно, окраска антоцианов и антоцианидинов обуславливается их чувствительностью к pH: в кислой среде (pH < 3) антоцианы (и антоцианидины) существуют в виде пирилиевых солей, при повышении pH до ~4-5 происходит присоединение гидроксидиона с образованием бесцветного псевдооснования, при дальнейшем повышении pH до ~6-7 происходит отщепление воды с образованием хиноидной формы, которая, в свою очередь, при pH ~7-8 отщепляет протон с образованием фенолята, и, наконец, при pH выше 8 фенолят хиноидной формы гидролизуется с разрывом хроменового цикла и образованием соответствующего халкона .
Антоцианы выделяются из растительного сырья хроматографией или экстракцией 1%-ным раствором HCL в метаноле.
Природным сырьём для получения антоцианов являются не только плоды черноплодной рябины, но и такие растения как черная смородина, каркадэ, красный виноград, черника и другие.
Антоцианы можно получить синтетическим путём из полигидроксибензальдегидов (схема 1).
Антоцианы относятся к вторичным метаболитам растений и служат им для защиты от неблагоприятных факторов, прежде всего от ультрафиолетового излучения, поражения вирусными инфекциями и плесенью. Они обладают широким спектром биологического действия и сочетают в себе антиоксидантные, бактерицидные, солнцезащитные свойства, обладают высокой капиляропротекторной (Р-витаминной активностью). Также антоцианы обладают красящими свойствами, то есть являются натуральными красителями [9].

Где В - остаток тетраацетилглюкозы

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В качестве объекта исследования использовали сырьё, собранное в 2012 году культивируемое в Кемеровской области.
Для получения водно-спиртового экстракта был использован метод мацерации с применением лабораторного реактора. Метод основан на настаивании измельчённого сырья с соответствующим экстрагентом в течение определённого времени [2]. Для ускорения процесса была применена турбо мешалка и поддержание повышенной температуры с помощью паровой рубашки реактора.
Приборы: блок регулирования температуры циркуляционный «МО1», мешалка верхнеприводная «RZR 2020», стеклянный реактор для лабораторного синтеза «Rad Ceys».
Реактивы: спирт 70%, содержащий 1% кислоты хлороводородной, вода дистиллированная, сухое измельчённое сырьё.
Далее проводился отгон спирта и концентрация экстракта с добавлением горячей воды и осаждением смолистых веществ.
Приборы: роторный испаритель «Heidolph», вакумный насос для фильтрования.
Затем проводился анализ полученного водно-спиртового экстракта по качественным и количественным характеристикам. Определяли антоцианы, фенолкарбоновые кислоты, дубильные вещества, флавоноиды, сумму фенольных соединений.
Реактивы: спирт 70%, раствор железоаммонийных квасцов, раствор 10% средней соли ацетата свинца, раствор калий перманганата, хлороводородная кислота, металлический цинк, порошок магния, 1% спиртовой раствор щелочи, 0,5% растворо хлорного железа, 5% раствор алюминия хлорида, 1% раствором желатина, 5% раствор калия бихромата, реактив Фолина-Дениса (смесь фосфорномолибденовой и фосфорновольфрамовой кислот.
Использовали химическую посуду: пробирки, часовые стёкла, колбы для титрования, делительные воронки и другое.
Проводили хроматографический анализ методом тонкослойной хроматографии для качественного обнаружения антоцианов, флавоноидов, фенольных соединений. Метод ТСХ основан на различии в скорости перемещения компонентов смеси в плоском тонком слое (толщина 0,1-0,5 мм) сорбента при их движении в потоке подвижной фазы (элюента).
Реактивы: смесь растворителей: н-бутанол - кислота уксусная ледяная - вода (4:1:2).
Использовали хроматографическую пластинку со слоем силикагеля, на алюминиевой подложке, высокоэффективной (ПТСХ-АФ-В или аналогичного качества), размером 100×100 мм.
Спектрофотометрически определяли количественное содержание флавоноидов и антоцианов. Метод спектрофотомерии основа на измерении оптической плотности растворов.
Приборы: спектрофтометр СФ-2000
Для фракционирования использовали следующие органические растворители: хлороформ, гексан, этилацетат, бутанол.

ГЛАВА 3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

3.1 Получение водно-спиртового экстракта

Получали экстракт сухих плодов аронии черноплодной методом мацерации. Измельчали сырьё в измельчителе, чтобы оно проходило через сито с размером пор 1см.
Коэффициент спиртопоглощения 0,7. Использовали 70% спирт, содержащий 1% кислоты хлороводородной.
Готовили экстракт в соотношении 1:5, и тогда для получения 400мл экстракта потребуется 80г сырья. Количество экстрагента 456мл (с учётом коэффициента).
Влажность сырья (1 порции 80г) 5,417%
Методика: Аналитическую пробу сырья измельчили до размера частиц около 10 мм, перемешали и взяли две навески массой 3-5 г, взвешенные с погрешностью +/- 0,01 г. Каждую навеску поместили в предварительно высушенную и взвешенную вместе с крышкой бюксу и поставили в нагретый до 100-105° С сушильный шкаф. Время высушивания отсчитывали с того момента, когда температура в сушильном шкафу вновь достигнет 100- 105°С. Первое взвешивание плодов через 3 ч. Высушивание проводили до постоянной массы [6].
Определение потери в массе при высушивании для пересчета количества действующих веществ и золы на абсолютно сухое сырье проводили в навесках 1-2 г (точная навеска).
Влажность сырья (X) в процентах вычисляют по формуле:

(m - m1)100
Х = -------------------,
m

где m - масса сырья до высушивания в граммах; m1 - масса сырья
после высушивания в граммах.
Схема (схема 2) процесса экстракции представление следующим образом:

.2 Качественный анализ

Определение фенольных соединенений
А) Реакция с железоаммонийными квасцами. К 2-3 мл извлечения добавляли несколько капель раствора железоаммонийных квасцов. О наличии в сырье фенольных соединений свидетельствует появление черно-синего или черно-зеленого окрашивания и осадка.
Б) Реакция с ацетатом свинца. К 1 мл извлечения добавляли 2 мл раствора 2% уксусной кислоты и 1 мл раствора 10% средней соли ацетата свинца. В уф свете наблюдалось ясно-голубое окрашивание [12].
Опеределение фенолкарбоновых кислот
Хроматографическое определение: 0,05 мл спиртового извлечения наносили микропипеткой или микрокапилляром на линию старта хроматографической бумаги EFN - 12 (Германия) размером 60 х 9 см в виде тонкой линии 10мм, рядом наносили в виде тонкой линии также в 10 мм 0,05 мл раствора достоверного образца кислоты хлорогеновой. Хроматографическую бумагу с нанесенными пробами высушивали на воздухе в течение 5 мин, затем помещали в камеру (предварительное насыщение камеры не менее суток), содержащую 70% раствор кислоты уксусной и хроматографировали восходящим способом. Когда фронт растворителей прошел 58 см, хроматографическую бумагу вынимали из камеры, высушивали в вытяжном шкафу в течение 10 мин и просматривали в УФ-свете при длине волны 360 нм (рис. 3). На уровне пятна достоверного образца хлорогеновой кислоты должно наблюдаться пятно желтого цвета, которое и было нами идентифицировано. При этом допустимо наличие других пятен.
Опеределение флавоноидов
А) Проба Синода. Взяв три пробирки с одинаковым количеством полученного экстракта (1 мл), в них прибавляли по 5 капель концентрированной кислоты хлористоводородной. Затем в одну из пробирок добавляли несколько крупинок металлического цинка, во вторую - порошок магния, в третьей оставался только фильтрат. Все пробирки нагревали на водяной бане до кипения и оставляли для охлаждения на 5-10 минут. О присутствии в извлечении флавоноидов свидетельствует окраска продукта реакции, которая зависит от группы флавоноидов. Третья пробирка контрольная: появление розового или красного окрашивания в ней указывает на наличие антоциановых пигментов, халконов и ауронов.

Рисунок 3 - Схема хроматограммы на бумаге на ФКК в плодах аронии черноплодной (система: 70% раствор кислоты уксусной): 1 - известный образец (хлорогеновая кислота); 2 - спиртовое извлечение плодов аронии черноплодной.

Б) Реакция со щелочью. К 0,5 мл полученного выше спиртового извлечения добавляли несколько капель 1% спиртового раствора щелочи. Флавоны и флавонолы растворяются в щелочах с образованием желтой окраски. Антоцианы дают синее или фиолетовое окрашивание.
В) Проба с 0,5% раствором хлорного железа. К 0,5 мл полученного выше спиртового экстракта добавляли 1-2 капли раствора хлорного железа. Давать окраску с хлорным железом - общее свойство полиоксифенольного соединения. Ортооксифенольные группы в молекулах флавоноидов обуславливают зеленую, а триоксифенольные группы - синюю окраску.
Г) Проба с алюминия хлоридом. К 1 мл спиртового извлечения добавляли 3-5 капель 5% спиртового раствора реактива. При наличии флавоноидов появляется грязно-желтое окрашивание [5, 12].
Д) Хроматографическое определение. Испытуемый раствор. Около 2,0г сырья, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм, помещали в коническую колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляли 20 мл 95 % спирта этилового, закрывали пробкой и перемешивали в течение 30 мин на встряхивающем аппарате. После охлаждения извлечение фильтровали через бумажный фильтр.
На линию старта хроматографической пластинки со слоем силикагеля, на алюминиевой подложке, высокоэффективной (ПТСХ-АФ-В или аналогичного качества), размером 100×100 мм, проведенную на расстоянии 1,5 - 2 см от нижнего края пластинки, микропипеткой наносили 0,02 мл извлечения в виде пятна диаметром около 5 мм. В качестве заведомо известных веществ сравнения наносили по 0,02 мл растворы рутина и кверцетина также в виде пятен диаметром около 5мм. Пластинку с нанесенными пробами высушивали на воздухе при комнатной температуре, затем помещали в хроматографическую камеру (выложенную изнутри фильтровальной бумагой, предварительно насыщенную не менее 24 часов) с верхним слоем смеси растворителей: н-бутанол - ледяная уксусная кислота - вода (4:1:2) и хроматографировали восходящим методом.
Когда фронт растворителей прошел не менее 8 см от линии старта, пластинку вынимали из камеры, высушивали в вытяжном шкафу при комнатной температуре до удаления следов растворителей и просматривали в видимом и УФ - свете.
На хроматограмме испытуемого раствора на уровне пятна достоверного образца рутина обнаруживали зону адсорбции в виде пятна желтого цвета, которая полностью совпадала с зоной адсорбции спиртового извлечения из плодов аронии черноподной (Rf - 0,57). При этом допускается обнаружение дополнительных зон (рис. 4).

Рисунок 4 - Схема ТСХ на флавоноиды в плодах аронии черноплодной (система: н-бутанол - кислота уксусная ледяная - вода (4:1:2)): 1 - известный образец раствора рутина; 2 - известный образец раствора кверцетина; 3 - спиртовое извлечение плодов аронии черноплодной.

Определение дубильных веществ
А) Осаждение 1% раствором желатина: к 2 мл испытуемого раствора добавляли по каплям 1% раствор желатина в 10% растворе натрия хлорида. При наличии дубильных веществ появляется осадок, исчезающий при добавлении избытка желатина.
Б) Реакция с калия дихроматом: к 3-5 мл извлечения добавляли 2-3 капли 5% раствора калия бихромата. При наличии таннидов наблюдается потемнение раствора или выпадение желто-коричневого осадка.
В) Реакция с реактивом Фолина-Дениса (смесь фосфорномолибденовой и фосфовольфрамовой кислот). К 3-5 мл извлечения добавляли 3-5 капель реактива Фолина-Дениса и небольшое количество натрия карбоната. При наличии таннидов образуется вольфрамовая или молибденовая синь. Окраска устойчива. Эта реакция может быть использована для количественного определения дубильных веществ [5, 12].
Опеределение антоцианов
А) К 1 мл испытуемого раствора прибавляли 1 мл 1 % кислоты хлористоводородной, раствор окрашивался в интенсивно красный цвет.
Б) В пробирку помещали 0,5 мл извлечения и добавляли 0,5 мл 10% раствора натрия гидроксида. В присутствии антоцианов появлялось окрашивание сине-зеленого цвета.
В) Метод ТСХ. На линию старта хроматографической пластинки со слоем силикагеля, на алюминиевой подложке, высокоэффективной (ПТСХ-АФ-В или аналогичного качества), размером 100×100 мм, проведенную на расстоянии 1,5 - 2 см от нижнего края пластинки, микропипеткой наносили 0,02 мл извлечения в виде пятна диаметром около 5мм. Пластинку с нанесенными пробами высушивали на воздухе при комнатной температуре, затем помещали в хроматографическую камеру (выложенную изнутри фильтровальной бумагой, предварительно насыщенную не менее 24 часов) с верхним слоем смеси растворителей: н-бутанол - кислота уксусная ледяная - вода (4:1:2) и хроматографировали восходящим методом.
Когда фронт растворителей прошел не менее 8 см от линии старта, пластинку вынимали из камеры, высушивали в вытяжном шкафу при комнатной температуре до удаления следов растворителей и просматривали в видимом свете.
На хроматограмме испытуемого раствора наблюдали зону адсорбции фиолетового цвета с величиной Rf около 0,35 (цианидин - 3-О- глюкозид); возможно присутствие розового пятна с величиной Rf около 0,5 (гликозид мальвидина); допускается обнаружение дополнительных зон (рис. 5).
Известно также, что в данной системе растворителей стандартный образец цианидин-3-О- глюкозида дает Rf - 0,35.Это дает нам возможность утверждать, что в извлечениях из плодов аронии черноплодной присутствует данное вещество.
Похожие материалы:

Добавление комментария

Ваше Имя:
Ваш E-Mail:

Код:
Включите эту картинку для отображения кода безопасности
обновить, если не виден код
Введите код: